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        基因設計常見問題
        2015-8-18
        來源:互聯網
        點擊數: 7764          作者:未知
        • 1、為什么要進行全基因合成?

          最常見的獲得目的基因的方法是PCR 擴增釣取基因。但很多的時候,擴增只會得到痕量或根本就得不到目的基因。如果用這種方法,首先,必須準備某一特定組織的cDNA文庫,就必須花時間去準備或訂購。其次,目的基因在文庫中的含量必須充足,否則就可能會找不到合適的方法釣取或克隆得到。第三,PCR擴增得到的目的基因可能會含有許多點突變或單核苷酸多態性,這會給您后期的實驗應用帶來極大麻煩。

          2、密碼子優化有必要嗎?

          有必要。不同來源的種屬密碼子的偏好性不同。比如,在人體內受偏愛的密碼子對于E. coli來說可能是稀有的。

          3、什么是新基因?

          (1) 需經過密碼子優化以提高外源表達量的基因。

          (2) 從組織樣品不易獲得,但序列已知的基因。 

          (3) 需要特定突變的基因。

          (4)無法通過釣魚法獲得的或cDNA 文庫中不表達、豐度極低、很難通過 PCR 法獲取的基因。

          (5) 用于微芯片的大量cDNA。

          (6)您所感興趣的、自然界中還不存在對應蛋白表達與純化的新基因。

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